:: วิธีการย้อมสีเอเอฟบี / AFB Stain ตามวิธี Ziehl Neelsen ::

:: วิธีการย้อมสีเอเอฟบี / AFB Stain ตามวิธี Ziehl Neelsen ::

1.) การเกลี่ยเชื้อ (smear) บนสไลด์ให้กระจายเป็นฟิล์มบางๆ ไม่ให้หนาแน่นมากเกินไปและปล่อยให้แห้งในอากาศ (air dry)

2.) การตรึงเชื้อ (fix) ให้ติดแน่นกับสไลด์ ทำให้ไม่หลุดออกขณะย้อมสี การตรึงเชื้อทำได้โดยการผ่านสไลด์ที่เกลี่ยเชื้อไว้แล้วไปบนเปลวไฟอย่างรวดเร็ว 2-3 ครั้ง

3.) หยดสีคาร์บอลฟุคซิน (carbol fuchsin) ให้ท่วมรอยเกลี่ยเชื้อ นำไปผ่านไอน้ำร้อน 3-5 นาที หรือใช้เปลวไฟแกว่งลนไปมาบนรอยเกลี่ยเชื้อนาน 3 นาที เทสีทิ้ง และทิ้งให้เย็น จึงล้างด้วยน้ำสะอาด

4.) หยดแอลกอฮอล์กรด (acid alcohol) ทิ้งไว้ประมาณ 1-2 นาที หรือจนไม่มีสีละลายออกมา แล้วล้างด้วยน้ำ

5.) หยดสีเมทิลีนบลู บนรอยเกลี่ย ทิ้งไว้ประมาณ 1 นาที จึงล้างด้วยน้ำและซับให้แห้ง ตรวจดูด้วยกล้องจุลทรรศน์

[ที่มา : นงลักษณ์ สุวรรณพินิจ และ ปรีชา สุวรรณพินิจ "จุลชีววิทยาทั่วไป" สำนักพิมพ์แห่งจุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย, 2541, หน้า38]



แหล่งศึกษาข้อมูลเพิ่มเติม
 - ศรีนวล สมรูป. การตรวจทางจุลภาคพื้นฐานที่ใช้ในหองปฏิบัติการจุลชีววิทยา. วารสารวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยี 2555;20(3):247-254. http://tujournals.tu.ac.th/tstj/detailart.aspx?ArticleID=178